SB Carlsberg Flask

Alfa Laval SB Carlsberg Flask koostuu tasapohjaisesta sylinterimäisestä säiliöstä ja yläkannesta, jossa on hengittävät suodattimet, kalvonäytteenottoventtiili ilmastusta ja istuttamista varten ja mikronäytteenottoyhde puhtaan hiivakulttuurin aseptiseen siirtämiseen. Puhtaan hiivaviljelmän siirtämisessä Alfa Laval SB Carlsberg Flask -laitteesta hiivaviljelyyn on tärkeää, että kaikki letkujen päät on kiinnitetty tukevasti letkupinteillä.

Laite täytetään nettokapasiteettiinsa (noin 80 % kokonaistilavuudesta) vierteellä ja steriloidaan autoklaavissa, kaasulämmittimellä tai sähkötoimisella kuumennuslevyllä. Laite laitetaan sitten jääkaappiin tai kylmiöön vierteen jäähdyttämiseksi haluttuun käyttölämpötilaan. Kylmä vierre ilmastetaan ilmastuslansettiin liitetyn kalvonäytteenottoventtiilin kautta.

Hiivaviljelmän voi istuttaa aseptisesti kalvokiinnikkeen kautta ruiskulla. Vaihtoehtoisesti kuivahiivaviljelmän voi siirtää laitteeseen käyttämällä tyhjää suodatinkoteloa suppilona.

Hengittävän suodattimen voi jättää kiinni steriloinnin ajaksi. Jos hengittävä suodatin on steriloitu erillään, on tärkeää kiinnittää se takaisin, kun höyryä haihtuu edelleen laitteesta (virteen sterilisoinnin loppuvaiheessa), jotta myös suodattimen yhde steriloituu. Tyhjää suodatinkoteloa voi myös käyttää suppilona, jonka avulla kuivahiivaviljelmän saa siirrettyä laitteeseen.

Kylmä vierre ilmastetaan sitten ilmastuslansettiin liitetyn kalvonäytteenottoventtiilin kautta. On tärkeää käyttää steriiliä ilmaa. Turvallisuussyistä on myös suositeltavaa syöttää vierre kalvonäytteenottoventtiilin eteen kiinnitetyn suodattimen läpi.

Ilman syötön ja virtauksen tulee olla kohtalainen liiallisen vaahtoamisen välttämiseksi. On tärkeää, että vaahto ei pääse kosketuksiin hengittävän suodattimen kanssa, jotta tämä ei tukkeutuisi ja vahingoittuisi.

Helpoin tapa määrittää oikeat olosuhteet ilman syötölle ja ilmastuksen kestolle (alle 10 minuuttia) on tekemällä testi siten, että laitteen kansi on avoinna. Huomaa, että tällaisista testeistä saatua hiivaviljelmää ei pidä käyttää.

Kun vierre on hyvin ilmastettu, hiivaviljelmä istutetaan aseptisesti kalvoliittimen kautta 150–200 ml:n ruiskulla. Kuivahiivaviljelmän voi myös siirtää laitteeseen tyhjän suodatinkotelon kautta. Jos hiivaa tarvitaan suurempi määrä, kannen voi purkaa ja viljelmän kaataa laitteeseen. Tämä menettely edellyttää kuitenkin steriiliä ympäristöä ja mahdollisimman tiukkoja varotoimia.

Puhtaan hiivakulttuurin siirtäminen hiivan kasvatuslaitokseen tulee tehdä kräusen-vaiheen ollessa voimakkaimmillaan. Siirto tapahtuu aseptisissa olosuhteissa ja vaatii steriilin ilman syöttämistä hengittävään suodattimeen. Steriilin ilmansyötön suositeltu paine kasvatuslaitokseen istuttamisen aikana on 2 bar, eikä se saa koskaan ylittää 5 bar (72,5 psi). Hiivaviljelmän voi painaa laitteesta siirrostuslaitteeseen, kun Carlsberg Flask -laitteen kannessa oleva kalvonäytteenottoventtiili on liitetty kohdeastian näytteenottolaitteeseen (ymppääjään).

Liitosletku, kalvonäytteenottoventtiili ja kaikki muut yhteet on steriloitava perusteellisesti alkoholilla tai höyryllä ennen siirron toteuttamista. Toimintojen välillä venttiilin voi tiivistää alkoholilla, jonka voi sitten huuhdella pois steriilillä ilmalla ennen käyttöä.

Kun liitos on muodostettu ja siirto on tarkoitus aloittaa, on suositeltavaa avata ensin steriilin ilman syöttö, sitten laitteen päällä oleva kalvonäytteenottoventtiili ja lopuksi siirrostuslaitteen näytteenottolaite.

Kun viljelmä on siirretty (kuplimisen ääni siirrostuslaitteessa), suosittelemme ilman syötön jatkamista vielä muutaman minuutin ajan, jotta voidaan varmistaa hiivaviljelmän siirtyminen kokonaisuudessaan.

Lopuksi kohdeastian näytteenottolaite ja Alfa Laval SB Carlsberg-laitteen kalvonäytteenottoventtiili voidaan sulkea, jolloin ilman syöttö käytännössä katkeaa.

Käytön jälkeen laite tulee purkaa ja pestä käsin normaaleilla pesuaineilla.